細(xì)胞介紹

K562/ADR為由K562細(xì)胞構(gòu)建的耐ADR藥物細(xì)胞株。

細(xì)胞特性

1）來源：人慢性髓系白血病細(xì)胞耐藥篩選 2）形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣；圓形，懸浮生長 

3）含量：>1×106  細(xì)胞數(shù) 4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 

5）用途：僅供科研使用。 

細(xì)胞運(yùn)輸、保存及注意事項(xiàng)

 復(fù)蘇細(xì)胞 凍存細(xì)胞 

包裝 充液的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 1mL凍存管 

運(yùn)輸條件 常溫 干冰 

保存方式 37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱 -80℃冰箱中保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或立即復(fù)蘇 

※注意事項(xiàng) 1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、漏液及細(xì)胞有污染；或凍存管有破損，融化、漏液等，請立即拍照并聯(lián)系我們。照片包括細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管外觀，顯微鏡下細(xì)胞照片（100倍，200倍各2張）；2. 復(fù)蘇細(xì)胞的充液培養(yǎng)基為不含藥物的維持培養(yǎng)基，血清濃度較低，收到細(xì)胞后請及時(shí)更換為完全培養(yǎng)基；3. 建議收到細(xì)胞后，首先進(jìn)行擴(kuò)增（至少3代），并凍存部分細(xì)胞以備用。4. 初次培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)8×105個(gè)/mL時(shí)，可加入500ng/mL ADR的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細(xì)胞細(xì)胞密度達(dá)1×106個(gè)/mL后傳代。細(xì)胞傳代1~2次后仍能保持增殖，即可提高藥物濃度至1ug/mL繼續(xù)培養(yǎng)；若此過程中細(xì)胞停止增殖，且狀態(tài)較差，則需降低藥物濃度（首次降低一半藥物濃度）或使用不含藥物的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細(xì)胞密度達(dá)8×105個(gè)/mL，且生長狀態(tài)較好時(shí)，再更換為所需的ADR藥物濃度。5. 細(xì)胞凍存過程中，不可添加藥物。 

細(xì)胞培養(yǎng)試劑的配制

1）ADR藥物的配制及保存

建議將ADR藥物配制成1mg/mL的母液，即使用10mL PBS溶液溶解10mg ADR藥物，使其完全溶解后，使用0.22um濾器過濾除菌。

注意：可根據(jù)用量配置藥物，并將藥物分裝保存，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致藥物失效。溶解后的ADR，4℃保存1周，-20℃保存1個(gè)月，-80℃保存6個(gè)月。

2）凍存液的配制

90%優(yōu)質(zhì)胎牛血清+10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。（凍存液中不含藥物）

3）完全培養(yǎng)基的配制

成分 體積/濃度 

優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10% 

雙抗 1% 

1ug/mL ADR 0.1%母液（1mg/mL） 

RPMI-1640培養(yǎng)基 補(bǔ)充至所需體積 

細(xì)胞培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%~80%。

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